雪村千鶴（Yukimura-Jiziru）
    CV：桑島法子
    與新撰組一同行動的少女，為了尋找失蹤的父親（綱道醫生）而來到京都，因為目擊了某個事件而被新選組所抓捕。在尋找父親的過程中，知道了新選組的秘密和自己出生的秘密。
    千鶴，堅忍而又善良的江戶之女，擁有鬼族之血的女子，以一個旁觀者（或是參與者）的身份見證新撰組的興衰。
    在遊戲不同線路中性格略有不同，例如在衝田眼中是一名纖弱女子，在風間眼中則為強情女子。在遊戲的不同線路中亦與不同角色有感情發展，各線路相互獨立，各不影響。漫畫依照遊戲改編，同樣是每個人物的劇情獨立成篇，互不影響。動畫則走土方線。
    其實走土方線是最為艱辛，最為傷感的一條線路，因為土方作為德川幕府和武士道精神直至最後一刻的末代武士的代表人物，不論漫畫還是史實上土方都是見證了新撰組由盛到衰的全部，其中包括了近藤勇的斬首，衝田總司的病死，還有其他戰友的戰死，可以說製作方選擇土方線進行製作是花了不少心思的。所以對於第二季大家要做好心理準備。
    動畫第8話中穿上藝妓裝
    新撰組
    土方歲三（Hijikata-Toshizo）
    CV：三木真一郎——孤臣身殉蝦夷島，忠魂永衛東方君
    身份：新撰組副長，被稱為鬼之副長
    流派：天然理心流
    簡介：佐幕之星－－土方歲三，是個善於謀略的劍術家與兵法家，不僅是他的謀略，劍術也是旁人所望塵莫及的。被喻為「新撰組實質支配者」的土方歲三，他的一生頗富傳奇性。在所有的幕末英傑之中，風流倜儻、身長五尺五寸以上的土方歲三，是公認除了英俊瀟灑的伊庭八郎之外，無人能及的美男子。指揮組織摸樣無情殘酷，令其他隊員不寒而栗、敬為鬼神。凶起來的時候真的很可怕，很難想象MIKI的配音居然也有這麼大的威懾。
    遊戲裏是唯一一個受到風間千景賞識認同並賜予【薄櫻鬼】稱號的人類。
    而後期，貫徹近藤局長的意誌戰鬥到最後；作為女主角的千鶴是目睹記錄了整個過程。
    漫畫中為了保護千鶴變成羅刹。
    動畫第十二話為與風間千景一戰，喝下變若水化身羅刹。
    衝田總司（Okita-Souji）
    CV：森久保祥太郎——薄如櫻花絢麗短暫的人生
    身份：新撰組一番組組長，天才劍士
    流派：天然理心流
    簡介：遊戲裏的衝田總司很喜歡開玩笑，喜歡戲弄隊友，和近藤局長關係甚好，其發型也是模仿近藤而來。喜歡與小孩子玩樂，對小孩子異常溫柔，很得小孩子的喜愛。也常被旁人稱為“長不大的孩子”，具有純真善良的一麵。但是一到戰鬥就會非常冷酷無情，遇到任務時也總喜歡把“殺人”二字放在嘴邊。將自己視為為新選組而戰鬥的“劍”，即使身染絕症亦堅持以劍士的身份活下去。對於他來說，存在於新選組的意義就是消滅從小照顧自己的局長近藤勇的敵人，非常尊敬近藤勇，是自己前進變強的動力。劍術自然是新選組的第一，對於自己身為一番組組長的責任很看重。
    在“池田屋事變”中（動畫第三話）咳血暈倒，知道自己得了肺癆，而一直隱瞞隊友，堅持帶病執行任務。也常在此之後露出雖然與眾人玩笑，但常常露出溫柔又寂寞的眼神，讓人不由得心痛。這大概也是這款遊戲裏衝田總司最具魅力的一點。
    動畫第六話中，再次咳嗽。
    動畫第七話中，被查出患有肺結核（在當時是絕症）堅持呆在新撰組並要千鶴保密，希望能一直戰鬥到最後。
    漫畫中為了保護千鶴變成羅刹。
    動畫第十話中，南雲熏給了總司變若水動畫第十一話中，因為看到近藤局長被刺客所傷，但卻因為身體原因不能繼續戰鬥，於是喝下了變若水，最終羅刹化。然後幫千鶴擋下兩顆銀質子彈。（羅刹化的總司超帥）
    動畫第二季第六話中，臨終前羅刹化後孤身一人於前來企圖謀殺土方歲三的數十來人戰鬥，最終身中數刀病後死而去。
    齋藤一（Saitou-Hajime）
    CV：鳥海浩輔一——沉默的一匹狼，合掌百鬼夜行狼牙現
    身份：新撰組三番組組長，左撇子居合斬的高手
    流派：無外流、一刀流，劍術在新選組中也是數一數二的
    簡介：齋藤是土方的擁護者，隊裏最尊敬的就是土方，當然對副長的命令絕對的服從。雖然外貌是這種印象，但他還不完全是無口，隻不過是說話簡潔，沒有廢話罷了，把感情藏得很深倒是事實，平時很容易忽略，回過頭來細想的話其實到處都布滿了他的身影。性格單純，很容易相信別人所說的話，比如在特典drama裏，他輕易地相信了土方誇大的石田散藥的藥效，在桃太郎中也希望以此作為任務獎勵。天然呆，第一次穿洋裝結果扣子扣錯的齋藤，在被千鶴提醒後，說：“我待會兒去重扣……”有著跟年齡相符的執拗與不同於同齡人的認真；雖然跟平助是同年生，但與平助相比很不善於言辭。最大的煩惱：“時代的變遷導致了劍不再是有用的東西，他所堅信的東西也許一夜之間就會被大家遺棄，那麼他的存在到底有什麼價值呢？”這種問題。比起現境的慘烈，其實心靈上的失落打擊對他更為沉重吧。後離開新選組，跟隨伊東甲子太郎，其實是土方派出的臥底。現已回到新選組。
    漫畫中為了保護千鶴變成羅刹（遊戲中，與千鶴結為夫婦）。最後離開新撰組。
    第九話看櫻花，闡道~美~
    藤堂平助（Toudou-Heisuke）
    CV：吉野裕行——“一馬當先”先生
    身份：新撰組八番組組長，最年輕的新選組幹部
    流派：北辰一刀流
    簡介：藤堂是一個直性子的人，並且是尊王攘夷思想的追隨者。他是典型的江戶人性格，是喜歡節日的江戶兒女，是個喜歡衝在人群及劍的修羅場的最前頭的愛起哄的人。在學問和武術方麵也都有所建樹。也正因為有著從江戶所養育出來的灑脫不羈的言行，所以也被描述為是個“品行很差但性格堅毅的人”。傳聞是個身材矮小但相貌俊美的男子。但後來離開了新選組，跟齋藤一一起跟隨伊東甲子太郎，但後來重回新選組。
    遊戲中平助是個很開朗的孩子，心裏怎麼想就怎麼表達；所以很容易理解。在千鶴做藝伎的時候很明確的表示——我不想你穿成這樣去服侍別的男人。
    漫畫中為了保護千鶴變成羅刹，已經離開新撰組。
    第三話在池田屋被天霧九壽打傷額頭…
    第九話和千鶴共同坐在櫻花樹下。
    第十話主動挑戰天霧九壽在此被打傷【吐血】…
    第十一話為了療傷主動喝下了羅刹水。
    原田左之助（Harada-Sanosuke）
    CV：遊佐浩二——我的願望就是娶一個妻子平穩的生活
    身份：新撰組十番組組長
    流派：寶藏院流槍術
    簡介：容易打架，毒舌，也有重人情世故，堅守義理的一麵。與刀相比，更擅長槍。原田左之助被譽為薄櫻鬼裏最有‘實力’的男主角；為什麼這麼說呢？因為他是唯一一個‘推倒’千鶴並且抱上兒子的厲害家夥……又因為在他眼中男性是為了保護女性而存在的，他的願望又是這麼的樸素肯定是一個好丈夫。對女性很溫柔。是一個有責任感的男人。
    第二季離開新選組，並幾次與背叛長洲藩的不知火匡一同與綱道所研製出的羅刹隊伍作戰，在殺死綱道後與不知火匡一同不知蹤跡。
    漫畫中喜歡千鶴，和千鶴KISS了並且成功的把千鶴俘虜了的男人。
    遊戲中是唯一一個擁有和千鶴生下孩子的結局動畫人物。
    永倉新八（Nagakura-Shinpachi）
    CV：坪井智浩
    身份：新撰組二番組組長
    流派：神道無念流北辰一刀流
    簡介：新撰組二番組組長，最喜歡劍術、酒和女人的江戶兒女。最討厭扭捏的事情，劍術在新撰組中也是數一數二的。
    近藤勇（Kondou-Isami）
    CV：大川透
    身份：新撰組局長
    流派：天然理心流
    簡介：新撰組局長，代表新撰組的大將，盡管鍛煉別人劍術並拿俸祿，但是很有人情味，容易流淚，相信幫助幕府的人才是真正的武士。
    第二季第四集為了救新選組去當誘餌，被新政府軍抓獲，第六集從齋藤一的情報中得知已被斬首死亡。
    山南敬助（Yamanami-Keisuke）
    CV：飛田展男
    身份：新撰組總長
    流派：北辰一刀流、天然理心流
    簡介：新撰組總長，原仙台藩士，表麵是不斷和藹微笑著的，但在另一麵卻是以靈活地表情在掌控著隊伍。目前已經變成羅刹，並帶領羅刹隊，繼續研究變若水。
    山崎烝（Yamazaki-Susumu）
    CV：鈴木貴征
    身份：新撰組諸士調役兼監察
    流派：不明
    簡介：新撰組諸士調役兼監察，從事新選組內部的監察及外部的諜報活動。尊敬著作為副長統禦著的土方。
    動畫第十二話為保護土方而被風間刺傷，最終死去。
    井上源三郎（Inoue-Genzaburou）
    CV：小林範雄
    身份：新撰組六番組組長
    流派：天然理心流
    簡介：新選組六番組組長。作為幹部中的年長者，因為十分耿直又誠實的人品而獲得了很高的人望。與同鄉同門的近藤和土方相互結下了十分的信賴關係。
    動畫第十二話為保護雪村千鶴中槍，後被隸屬於幕府軍的三名叛變武士所殺。
    島田魁
    CV：大羽武士
    身份：新撰組諸士調役兼監察，伍長，軍監
    流派：心形刀流
    簡介：新選組諸士調役兼監察，伍長，軍監。擔任新選組內部監察，諜報活動，二番組的伍長等職務。是隊內第一巨漢以及第一腕力。
    伊東甲子太郎
    CV：千千和龍策
    身份：新撰組參謀，禦陵衛士隊長
    流派：北辰一刀流
    簡介：新撰組參謀，禦陵衛士隊長。因為博學以及優秀的劍術被新選組邀請，作為參謀及近藤的聊天對象而入隊。但在動畫中卻不是顯得那麼簡單。其實他與新選組是敵對關係，後退出新選組，與薩摩聯合，並要殺死新新撰組長近藤，但因齋藤回新選組稟報，沒能得逞，後被新選組殺害（動畫第十話）。
    鬆本良順
    CV：佐藤宏太
    身份：醫生（千鶴的爸爸雪村綱道的朋友）
    第七話時幫助新選組成員檢查身體後遇到千鶴。
    鬼之一族
    風間千景（Kazama-Chikage）
    CV：津田健次郎——歸根結底，我們鬼族也好，新選組亦罷，都不過是這龐大組織與時勢洪流中之一粟（遊戲本篇（新選組奇譚）風間個人線路四章風間原話）
    身份：協助薩摩的西方鬼族首
    流派：無，實力強大的BOSS級角色，隻有羅刹化的土方可與之相提並論。
    簡介：平時是金色短發，血色雙眸，鬼族化姿態則為銀發金眼，額頭上會長出角。
    性格與目的在遊戲不同個人線路中有所不同。在其他人路線中以強勢Boss的形象出場，除因身屬薩摩而與新選組眾人為敵之外，還有一個目標是奪取千鶴。在風間線中則對千鶴意外溫柔，看起來是個有主見有責任心的大氣男人。
    統治西之鬼的風間一族的首領，因薩摩曾幫助藏匿鬼族，為還彼時恩情而協助薩摩。風間秉持身為鬼族的驕傲，對人類素無好感（隨想錄風間戀情想起三風間原話：“人類是愚蠢的生物。冠冕堂皇地宣揚和平，背後卻渴望與他人幹戈相向。所以，鬼避免與人類接觸。我無意再涉足今時的戰火，也不希望你（指千鶴）卷入其中”），計劃在還完薩摩的恩情後斷絕與人類的聯係，過隱居生活（在遊戲齋藤線中則完全相反，希望建立鬼之國）。在與新選組交手時發現了千鶴的存在。由於千鶴係此前因拒絕協助人類而被人類所滅的前東之鬼統治家族——雪村家族本家——的後裔，擁有純血鬼族的血統而想得到千鶴，娶其為妻，並就此再度與新選組數次交手，而後逐漸對堅持貫徹自身信念的新選組產生了興趣（如果在遊戲中走風間線，結局風間本人會告知數次搶親隻不過是與新選組眾人會麵的借口）。
    風間厭惡羅刹，認為羅刹是與真正的鬼族有著雲泥之別，不倫不類的“偽物”（まがい物）。在遊戲土方線（動畫亦走土方線）中最後認可了土方與新選組，並送出了“薄櫻鬼”這最高的讚美之詞。
    風間在動畫第七話中表現出對新選組的興趣
    在動畫第三、四、六、七、八、九、十二集出場
    第三話在池田屋初次見到千鶴。
    第四話時在天王山與土方一行交手，故意將千鶴刺傷，並證實千鶴是鬼（刺傷千鶴係動畫原創情節，遊戲中無此類情節）。
    第六話後半部分在二條城要把千鶴帶走，未能如願。
    第七話來到新選組屯所告知千鶴的父親綱道已轉向倒幕派。
    第九話再次來到新選組屯所想帶走千鶴。
    第十二話在危難關頭出現救了雪村千鶴，後以鬼的真身示人與喝下變若水的土方歲三交戰，被羅刹化的土方歲三用刀劃傷臉部。
    天霧九壽CV：山口りゅう
    協助薩摩的鬼，擅長徒手戰鬥。
    性格穩重，很有禮貌，經常在特別關頭阻止風間。
    第三話打傷平助。第十話時把平助打吐血。
    第十二話從天而降，攔住了土方歲三砍向風間千景的刀。
    第二季第五話因風間千景背叛鬼族榮譽棄他而去，現行蹤不明。
    不知火匡CV：吉田裕秋
    協助長洲藩的鬼，擅長槍戰。
    性格有點狂妄不羈，隻要麵對原田就很有興致去戰鬥。
    後因為長洲藩支持綱道背叛長洲藩，幾次與原田左之助一同與綱道所研製出的羅刹隊伍作戰，在殺死綱道後與原田左之助一同不知蹤跡。
    千姬CV：石川綾乃
    鬼族公主，同千鶴同是純血鬼族並且是鈴鹿禦前的末裔，動畫第四話、第七話，第八話，第九話、第十一話中出現，動畫中說明支持千鶴
    性格開朗
    君菊（Kimi-Kiku）CV：勝田晶子
    千姬的仆人（世代侍奉公主殿下的忍者），同時也是花魁。
    動畫第四話，第八話，第九話、第十一話中出現
    南雲熏CV：伊藤葉純
    在街頭遭浪士調戲時，為衝田所救的少女，其實是個少年，喜歡男扮女裝。千鶴的雙胞胎哥哥，因為在鬼族中女鬼可延續血脈且數量稀少，極為珍貴，所以南雲熏經常被歧視。小時候同千鶴在一起時很愛護她，之後因為家族拒絕參與倒幕，而慘遭滅門。綱道帶走了千鶴，而自己被土佐的南雲家收養且受盡虐待，因此對妹妹的愛變得扭曲，開始憎恨千鶴。後給衝田變若水，使得衝田從此化為羅刹。南雲薰希望令衝田痛苦從而令妹妹痛苦。
    動畫第六話，第八話出場，第九話（躲在角落裏暗笑），第十話出場（給衝田變若水）。第十一話（穿著男裝）。是反派角色。
    第二季第三集被風間千景突襲心髒而死。
    雪村綱道CV：齋藤龍吾
    雪村分家的鬼，女主人公千鶴的養父，蘭方醫(也就是現在的西醫）。因為工作的關係來到了京都，是“變若水”的研製者，後來杳無音訊。跟新選組似乎有所關聯。實際與千鶴的哥哥南雲薰相同，為一反派角色，希望建立鬼之國。
    第二季第六集被原田左之助一槍刺死。